在環(huán)境科學與工業(yè)衛(wèi)生領域,多環(huán)芳烴(PACs)作為一類廣泛存在的污染物,其含量和毒性評估一直是研究的重點。Moltox硝化試驗作為一種高效、靈敏的分析方法,為量化復雜混合物、燃燒產物及相關環(huán)境樣品中的PACs提供了強有力的支持。
Moltox硝化試驗的核心在于利用化學硝化反應將PACs轉化為硝基衍生物,進而通過特定的生物測試方法——Ames試驗,來評估這些硝基衍生物的致突變性。這一轉化過程不僅提高了PACs的檢測靈敏度,還賦予了該方法近乎絕對的化學選擇性,確保只有PACs被衍生化并用于后續(xù)的毒性評估。
試驗過程中,首先需要對樣品進行化學硝酸處理,通常在80℃下與濃硝酸反應30分鐘。這一步驟確保了即使對于耐衍生化的化合物也能發(fā)生反應,從而提高了方法的整體靈敏度。隨后,硝化反應完成后的樣品會被冷卻至室溫,并用二氯甲烷進行萃取。萃取后的殘留物會被重組為二甲基亞砜(DMSO),用于后續(xù)的Ames測試。
Ames試驗,特別是非活化試驗版本,是Moltox硝化試驗的重要組成部分。該版本的Ames試驗使用了具有內源性硝基還原酶的TA98菌株,這使得硝基PACs能夠在細菌內部被活化為致突變形式,而無需添加外源代謝混合物(S-9)。這一特性不僅提高了試驗的靈敏度,還使得DNA加合物物種在細菌內部產生,避免了通過細胞壁運輸的復雜過程。
Moltox硝化試驗的終點是硝化致突變性指數(NMI),它反映了樣品中硝基PACs的致突變效力。雖然NMI不能直接預測致癌潛力,但它可以作為比較各種復雜混合物相對PACs含量的一種有效手段。此外,由于改良Ames試驗和硝化試驗中測得的致突變性與PACs濃度成正比,因此可以在具有相似組成特征的樣品之間建立相關曲線,進一步拓展了該方法的應用范圍。
綜上所述,Moltox硝化試驗以其高靈敏度、高選擇性和簡便的操作流程,在環(huán)境污染物檢測、工業(yè)衛(wèi)生監(jiān)測以及生物監(jiān)測研究中發(fā)揮著重要作用。