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北京華新康信生物科技有限公司代理Biosearch品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Biosearch品牌代理商。Biosearch一級(jí)代理
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Biosearch代理 北京華新康信生物科技有限公司 Biosearch一級(jí)代理
Biosearch品牌提供一系列免疫化學(xué)試劑,其中包括半抗原報(bào)告基團(tuán)和蛋白質(zhì),F(xiàn)ICOLL和熒光團(tuán)偶聯(lián)物。
Biosearch品牌半抗原結(jié)合物
我們的結(jié)合物系列包括經(jīng)過(guò)充分研究的小分子半抗原,例如DNP,TNP,NP,NIP和PC(磷酸膽堿)。根據(jù)研究人員所需的抗體反應(yīng),可以使用各種水平的綴合密度。這樣的試劑是*抗原,可用于在動(dòng)物模型中誘導(dǎo)抗體應(yīng)答。
NP-KLH(匙孔血藍(lán)蛋白)
使用NP的消光系數(shù)= 4.23 x 10E + 03,通過(guò)在430nm下測(cè)量NP吸光度來(lái)確定pH值為8.5時(shí)的結(jié)合。假設(shè)KLH的分子量為100,000,則共軛比以NP與KLH的摩爾比給出。將溶液分裝在+ 5°C下。如果冷凍,KLH將從溶液中分離出來(lái)。避光。該產(chǎn)品可以1mg / mL的濃度溶于PBS緩沖液,水或其他中性緩沖液中。產(chǎn)品溶解或儲(chǔ)存在溶液中可能會(huì)沉淀,因此,建議在使用前將溶液超聲處理30分鐘。使用PBS時(shí),請(qǐng)參考以下配方。PBS配方:8克氯化鈉0.2克氯hua鉀0.2克磷酸二氫鉀(KH2PO4)1.15克磷酸氫二鈉(Na2HPO4)加到1升水中
LGC Biosearch Technologies不提供定制的免疫化學(xué)產(chǎn)品。對(duì)于任何給定的免疫化學(xué)試劑,其結(jié)合率將隨每次生產(chǎn)而變化。我們沒(méi)有辦法預(yù)測(cè)下一次生產(chǎn)的比例。我們預(yù)計(jì),摩爾比的微小變化(如每個(gè)蛋白質(zhì)12個(gè)半抗原)不會(huì)改變性能。可用的共軛比率可以在免疫化學(xué)產(chǎn)品類(lèi)別內(nèi)每個(gè)特定產(chǎn)品網(wǎng)頁(yè)底部的“數(shù)量”框右側(cè)的“負(fù)載”下拉菜單下找到。
共軛比是半抗原與蛋白質(zhì)的摩爾比。我們建議使用比爾定律來(lái)計(jì)算共軛比:
A =ε* L * C
以下是NP-BSA(與牛血清白蛋白共軛的4-羥基-3-硝基苯基乙?;肟乖┑墓曹棻扔?jì)算示例。
已知值
甲NP(半抗原(NP)在430納米,pH 8.5的測(cè)定吸光度):對(duì)于這個(gè)例子,我們將使用OD430 = 1
ε NP(在430nm處的半抗原(NP)的消光系數(shù)):4230中號(hào)-1 cm -1
L(路徑長(zhǎng)度):通常將此值假定為1 cm
計(jì)算Ç NP(半抗原(NP)的摩爾濃度)
C ^ NP = A NP /(ε NP * L)
C ^ NP = OD430(無(wú)單位)/(ε NP(M -1厘米-1)* 1厘米)
Ç NP = 1/4230 M -1
C NP = 0.000236摩爾或236 uM
計(jì)算C BSA(BSA的摩爾濃度)
如果提供了質(zhì)量濃度,請(qǐng)確保通過(guò)將質(zhì)量濃度除以分子量來(lái)轉(zhuǎn)換為摩爾濃度。例如,如果將NP-BSA溶解在0.1 M NaHCO 3(pH 8.5)中1 mg / mL(根據(jù)產(chǎn)品頁(yè)面“技術(shù)規(guī)格”標(biāo)簽下的使用說(shuō)明,建議使用),則BSA的質(zhì)量濃度為1毫克/毫升或1克/升。
知道BSA的大約分子量(MW)為60,000 g / mol,則BSA的摩爾濃度為:
C BSA =質(zhì)量濃度/ MW
C BSA =(1 g /升)/(60,000 g /摩爾)
C BSA = 0.0000167摩爾/升或16.7 uM
計(jì)算共軛比(半抗原(NP)與(BSA)的摩爾比(n))
n = C NP / C BSA
n = 236 uM / 16.7 uM
n≈與每個(gè)BSA分子(NP14-BSA)綴合的NP半抗原
半抗原與蛋白質(zhì)的高可用綴合比(即NP / BSA)在ELISA分析中應(yīng)用于捕獲半抗原特異性抗體
關(guān)于免疫化學(xué)試劑,單詞“負(fù)荷”是指綴合比,其是綴合單個(gè)蛋白質(zhì)的半抗原基團(tuán)的平均數(shù)。通常認(rèn)為,用較低密度的半抗原載體進(jìn)行免疫,再加上低免疫原劑量,將優(yōu)先在較低的免疫應(yīng)答中觸發(fā)高親和力抗體。相反,用高密度半抗原載體結(jié)合高免疫原劑量進(jìn)行免疫可能會(huì)引發(fā)更高的免疫反應(yīng),因?yàn)檫€會(huì)觸發(fā)低親和力抗體。
我們的免疫化學(xué)產(chǎn)品沒(méi)有沉淀出明礬,我們不提供此服務(wù)。您可以在以下參考資料中找到明礬沉淀的協(xié)議:細(xì)菌LPS和/或明礬沉淀響應(yīng)多糖和蛋白質(zhì)抗原的佐劑作用。
北京華新康信生物科技有限公司是Biosearch品牌代理商。